微生物操作中常见问题有哪些-凯发k8旗舰厅

微生物操作中常见问题的讨论与分析

1、划线获得单个菌落的方法。划不出单个菌落的原因：

(1) 平板上有过多的水分；

(2) 划线时接种环未经反复灼烧；

(3) 多区划线，三区或四区划线。

2、培养基配制时应注意的问题：

(1)灭菌温度要严格控制，按照要求灭菌，尤其含糖量较高的培养基温度不应太高，过高会导致糖分焦化，影响质量；

(2)琼脂培养基不能反复溶化。反复溶化会破坏培养基中的营养成分；

(3)培养基不能反复灭菌，反复灭菌也会导致营养成分的破坏；

(4)含琼脂的培养基灭菌后，要摇匀。

3、产品的保存：

(1) 干粉培养基：避光干燥，结块后不能使用。

(2) 亚碲酸钾卵黄增菌液、50%卵黄乳液等：冷冻保存，使用时，要常温解冻，避免水浴加热。

(3) 抗生素类：冷藏保存，温度过高会导致灵敏度的下降。

(4) 兔血浆：冷藏保存少量的红色不会影响结果。

4、观察时间的掌握：

按sn、gb等标准或培养基的使用说明所述时间进行观察，时间过短或时间过长，单菌落的特征都不会很明显。如单增李斯特氏菌显色培养基，时间短单菌落看不到卵磷脂环，时间长绵羊李氏菌也会产生沉淀环。

5、添加剂的添加：

(1)温度的掌握。卵黄和抗生素类添加的温度都不应太高。

(2)定量。过多会抑制一些目标菌，太少又导致杂菌的过度生长。

6、接种方法：

常用的方法主要有划线、三点接种、穿刺接种、倾注接种、涂布接种、液体接种。

7、生化实验：

(1)接种的方法

(2)氧化型和发酵型实验操作

(3)阳性菌种的对照

(4)接种前的纯化。挑取单个菌落进行一系列的生化。